УДК 635.64:631:527:632.9
https://doi.org/10.25630/PAV.2021.55.18.004
Ерошевская А.С., Егорова А.А., Милюкова Н.А., Пырсиков А.С.
В статье представлены результаты молекулярно-генетического анализа F1 гибридов томата разных товарных групп на наличие аллелей гена устойчивости Cf-9 к кладоспориозу. Молекулярно-генетический анализ проводили в лаборатории маркерной и геномной селекции растений ФГБНУ ВНИИСБ в 2019 году. В качестве объекта исследования использованы 16 F1 гибридов томата, в том числе 10 крупноплодных, 1 кистевой, 1 коктейль и 4 черри. Повторность исследований двухкратная (одна повторность – одно растение). Для идентификации аллелей гена Cf-9 устойчивости к кладоспориозу применяли SCAR-маркер со следующими праймерами: CS5 (TTTCCAACTTACAATCCCTTC), DS1 (GAGAGCTCAACCTTTACGAA), CS1 (GCCGTTCAAGTTGGGTGTT). Реакционная смесь для ПЦР объемом 25 мкл содержала 50–100 нг ДНК, 2,5 мМ dNTP, 3 мМ MgSO4, 10 пМ каждого праймера, 2 ед. Taq-полимеразы (ООО «НПФ Синтол») и 2х стандартный ПЦР буфер. Реакцию проводили в амплификаторе Termal Cycler Bio-Rad T 100 по программе 95 °C – 5 мин, 35 циклов 95 °C – 20 с, 60 °C – 30 с, 72 °C – 30 с, финальная элонгация в течение 5 мин при 72 °C. Визуализацию результатов ПЦР проводили путем электрофореза в 1,7%-ном агарозном геле с 1х ТАЕ буфером, результаты анализировали с помощью системы Gel Doc 2000 (Bio-Rad Laboratories, Inc., США). При идентификации гена устойчивости Cf-9 к кладоспориозу у изучаемых гибридов томата F1 были выявлены фрагменты размером 378 п. н. (аллель Cf-9) и 507 п. н. (аллель 9DC), что указывает на их устойчивость к этому заболеванию. Согласно результатам исследований, из 16 F1 гибридов томата 13 устойчивы к кладоспориозу, причем у 12 из них выявлено наличие только аллелей Cf-9, 1 гибрид имеет в генотипе оба аллеля устойчивости – Cf-9 и 9DС. Доминантные гомозиготы по гену Cf-9 будут использованы в селекционных программах Агрофирмы «Поиск» для создания линий-доноров устойчивости к кладоспориозу.
Ключевые слова: томат, кладоспориоз, молекулярно-генетический анализ, устойчивость, донор
Ерошевская Анастасия Сергеевна, аспирант, м.н.с., ВНИИО – филиал ФГБНУ ФНЦО. E-mail: eroshnast@yandex.ru
Егорова Анна Анатольевна, канд. с.-х. наук, с.н.с., ВНИИО – филиал ФГБНУ ФНЦО. E-mail: edvaaed@rambler.ru
Милюкова Наталья Александровна, канд. биол. наук, с.н.с. лаборатории маркерной и геномной селекции растений, ФГБНУ ВНИИСБ, доцент кафедры генетики, селекции и семеноводства, РГАУ – МСХА имени К.А. Тимирязева. E-mail: milyukovan@gmail.com
Пырсиков Андрей Сергеевич, канд. с.-х. наук, н.с. лаборатории маркерной и геномной селекции растений, ФГБНУ ВНИИСБ. E-mail: andrey.pyrsikov@yandex.ru
- Ахатов А.К. Мир томата глазами фитопатолога. М.: Тов-во науч. изданий «КМК», 2016. 292 с.
- Руководство по болезням томата. Практическое пособие для семеноводов, овощеводов и консультантов по сельскому хозяйству / под ред. Б. Габора. Seminis, 1997. 81 c.
- Игнатова С.И., Терешонкова Т.А., Багирова С.Ф. Молекулярные исследования в области селекции томата на устойчивость к заболеваниям: краткий обзор последних достижений и приоритетных направлений // Гавриш. 2008. №3. С. 44–47.
- Хлесткина Е.К. Молекулярные маркеры в генетических исследованиях и в селекции // Вавиловский журнал генетики и селекции. 2013. Т.17. №4-2. С. 1044–1054.
- Чесноков Ю.В., Косолапов В.М. Генетические ресурсы растений и ускорение селекционного процесса. М.: ООО «Угрешская типография», 2016. 172 с.
- Barone A. Molecular marker-assisted selection for resistance to pathogens in tomato // A paper presented during the FAO international workshop on «Marker assisted selection: a fast track to increase genetic gain in plant and animal breeding?». 2003. Pp. 29–34.
- Moose St.P., Mumm R.H. Molecular plant breeding as the foundation for 21st century crop improvement. Plant Physiol. 2008. Vol. 147. Pp. 969–977. DOI: 10.1104/pp.108.118232.
- Игнатова С.И. Роль наследственного потенциала по устойчивости у томата в системе комплексной защиты в закрытом грунте // Гавриш. 2001. №6. C. 18–20.
- Plaschke J., Ganal M.W., Röder M.S. Detection of genetic diversity in closely related bread wheat using microsatellite markers // Theor. Appl. Genet. 1995. Vol. 91. Pp. 1001–1007. DOI: 10.1007/BF00223912.
- Шамшин И.Н., Кудрявцев А.М., Савельев Н.И. Создание генетических паспортов сортов яблони на основе анализа полиморфизма микросателлитных локусов генома: методика. Мичуринск, 2013. 44 с.
Для цитирования: Идентификация аллелей гена Сf-9 устойчивости к кладоспориозу у гибридов томата F1 селекции Агрофирмы «Поиск» / А.С. Ерошевская, А.А. Егорова, Н.А. Милюкова, А.С. Пырсиков // Картофель и овощи. 2021. №3. С. 35-37. https://doi.org/10.25630/PAV.2021.55.18.004
